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检测生物组织中的脂肪蛋白质论文

点赞:47959 浏览:95642 更新时间:2024-04-18 投稿人:原创本站原创

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这是篇免费的关于检测重复率方面的知识点,可作为检测抄袭参考。

一、如何检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质

一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类和脂肪和蛋白质

二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应.

1.可溶性还原糖(如葡萄糖和果糖和麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀.即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.

2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘(或被苏丹Ⅳ染液染成红色).

3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应.(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2作用,产生紫色反应.)

4.淀粉遇碘变蓝色.

三.实验材料

1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果和梨.(因为组织的颜色较浅,易于观察.)

2.做脂肪的鉴定实验.应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子).

3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清.

(四)实验试剂

斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g mL CuSO4溶液)和苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液和双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g mL CuSO4溶液)和体积分数为50%的酒精溶液,碘液和蒸馏水.

(五)方法步骤:

(一) 可溶性糖的鉴定

1.制备组织样液.

苹果或梨组织液必须临时制备,因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖.

2.注入2mL组织样液.

3.注入1mL新制的斐林试剂,振荡.

(现配现用和先混后加)

应将组成斐林试剂的甲液和乙液分别配制和储存,使用前才将甲和

乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液和乙液分别加入苹果组织样液中进行检测.

斐林试剂很不稳定,甲和乙液混合保存时,生成的Cu ( OH ) 2在70900C下分解成黑色CuO和水;甲和乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无

Cu ( OH ) 2生成.

4.水浴加热:试管放在盛有50650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 → 棕色 → 砖红色(沉淀)

最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者.

也可用酒精灯对试管直接加热.

防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;

缩短实验时间.

(二)脂肪的鉴定

取材和切片和制片:花生种子浸泡和去皮和切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水.

干种子要浸泡34小时,新花生的浸泡时间可缩短.

浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形.切片要尽可能薄些,便于观察.

染色:在子叶薄片上滴23滴苏丹Ⅲ(染色3分钟)或苏丹Ⅳ染液(染色1分钟).

染色时间不宜过长.

漂洗:用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精.

酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘脂肪滴的观察.同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴.

用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上12滴蒸馏水,盖上盖玻片.

滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡.

镜检:先低后高(高倍镜用法:移物换器时针反),低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘或红色圆形小颗粒.

装片不宜久放.

时间一长,油滴会溶解在乙醇中.

(三)蛋白质的鉴定

制备组织样液.(浸泡和去皮研磨和过滤.)黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间.加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液34滴,摇匀,溶液变紫色.

A液和B液也要分开配制,储存.鉴定时先加A液后加B液.

CuSO4溶液不能多加.

先加NaOH溶液,为Cu2与蛋白质反应提

供一个碱性的环境.A和B液混装或同时加入,会导致Cu2变成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效.

否则CuSO4蓝色会遮盖反应的真实颜色.可用蛋清代替豆浆.蛋清要先稀释.

如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净.

附:淀粉的检测和观察用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化.碘液不要滴太多,以免影响颜色观察。

二、生物实验报告:检验生物组织中的糖类脂肪和蛋白质

检测生物组织中的脂肪蛋白质论文

1.还原性糖实验

实验原理:牛奶中的乳糖是一种醛糖(由葡萄糖半乳糖构成),能还原斐林试剂(0.1% NaOH,5% CuSO4)中的Cu2产生砖红色Cu20沉淀。

实验过程

①取2块试管,编号水和牛奶;

②滴加4滴斐林试剂A液,再滴加4滴斐林试剂B液,摇匀;

③再分滴加7滴水和牛奶摇匀;

④同时用两个试管夹夹着在酒精灯上均匀加热30秒;

⑤观察并记录现象(牛奶显现砖红色)。

2.蛋白质实验

实验原理:牛奶中富含酶和磷蛋白等蛋白质,其中肽链中的CONH能在NaOH溶液中与CuS04稀溶液(1%)产生紫色,因而证明蛋白质存在。

实验过程:

①取2支试管,编号。分别注入约18试管水和牛奶;

②再分别注入18试管双缩脲试剂A,摇匀;

③再分别向试管中加入34滴双缩脲试剂B液,摇匀;

④观察并记录现象。(牛奶显现紫色)

3. 脂肪的鉴定

脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘。苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大,当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时,酒精中的苏丹Ⅲ进入脂肪中,将脂肪染成橘。

脂肪的鉴定方法:

1.制作花生子叶切片,滴加苏丹Ⅲ染色3分钟

2.吸取多余的染液,滴加50%的酒精洗去浮色,吸掉多余的酒精。

3.滴上蒸馏水,盖上盖玻片。

4.显微镜观察。

三、如何检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质

原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。糖类中的还原糖(如葡萄糖和果糖),与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀。脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应。淀粉遇碘变蓝色。因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类和脂肪或蛋白质的存在。

操作指南

1.材料 苹果或梨匀浆,马铃薯匀浆,花生种子(实验前浸泡34 h)及其匀浆,鸡蛋清(稀释10倍后使用),鲜肝提取液,质量分数为1%的葡萄糖溶液,食用油,豆浆,质量分数为1%的淀粉溶液。

2.用具 双面刀片,毛笔,培养皿,载玻片,盖玻片,显微镜,吸水纸,滴管,试管,试管架,试管夹,大和小烧杯,小量筒,三脚架,石棉网,火柴。

3.试剂

(1)斐林试剂甲液:质量浓度为0.1 gmL的NaOH溶液。乙液:质量浓度为0.05 gmL的CuSO4溶液。

(2)苏丹Ⅲ染液称取0.1 g苏丹Ⅲ干粉,溶于100 mL体积分数为95%的酒精溶液中,待全部溶解后使用。

苏丹Ⅳ染液称取0.1 g苏丹Ⅳ干粉,溶于50 mL丙酮中,再加入体积分数为70%的酒精溶液50 mL,充分混合后即可使用。

(3)双缩脲试剂A液:质量浓度为0.1 gmL的NaOH溶液(10 g NaOH加水至100 mL)。B液:质量浓度为0.01 gmL的CuSO4溶液(1 g CuSO4加水至100 mL)。

(4)此外还有碘液,体积分数为50%的酒精溶液,蒸馏水。

4.操作要点

(1)观察并记录各种试剂与相关物质反应产生的实验现象,具体操作参见步骤(3)(7)。

化合物 化学试剂 实验现象

2 mL葡萄糖溶液 1 mL斐林试剂,加热

2 mL食用油 3滴苏丹Ⅲ染液

2 mL豆浆 1 mL双缩脲试剂A液,摇匀;

4滴双缩脲试剂B液,摇匀

2 mL淀粉溶液 2滴碘液

(2)分组预测并用化学试剂实测各种生物组织中可能含有的物质种类,具体操作参见步骤(3)(7)。

(3)还原糖的检测和观察

①向试管内注入2 mL待测组织样液。

②向试管内注入1 mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。

③将试管放入盛有5065 °C温水的大烧杯中加热约2 min。

④观察实验现象。如果待测组织样液中还原糖含量较高,可见溶液的变化为:浅蓝色→绿色→棕→砖红色沉淀。

(4)脂肪的检测和观察(一)

向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察不同生物组织样液被染色的情况。

(5)脂肪的检测和观察(二)

制作花生子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着况。

①取材取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。

②切片用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用。

③制片

选材:从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片。

染色:在花生子叶薄片上滴23滴苏丹Ⅲ染液,染色3 min(如果用苏丹Ⅳ染液,染色1 min)。

清洗:用吸水纸吸去染液,再滴加12滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色。

盖片:用吸水纸吸去薄片周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。

④观察在低倍镜下寻找花生子叶薄片的最薄处,移到视野,将影像调节清楚后换高倍镜观察。在视野中可以清晰地看到被染成橘的脂肪颗粒。

(6)蛋白质的检测和观察

①向试管内注入待测组织样液2 mL。

②向试管内注入双缩脲试剂A液1 mL,摇匀;再注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀。

③观察实验现象。如果待测组织样液中蛋白质含量较高,可以观察到待测组织样液变成紫色。

(7)淀粉的检测和观察

①向试管内注入2 mL待测组织样液。

②向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。

四、求高一生物检测生物组织中的糖类和脂肪和蛋白质的实验报告

实验目的:检测生物组织中的糖类,脂肪,蛋白质的存在。

实验原理:糖类,脂肪,蛋白质遇特定溶液变色。

实验步骤:准备足够分量的生物组织样液。

实验1(糖类)

(1)向试管内注入2ML待测组织样液。

(2)向试管内注入1ML斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)

(3)将试管放在盛有5065度温水的大烧杯中加热约2MIN。待一段时间后观察其现象

实验2(脂肪)

(1)向试管内注入2ML待测组织样液。

(2)向试管内滴加3滴苏丹Ⅳ溶液。

(3)待一段时间后观察其现象。

实验3(蛋白质)

(1)向试管内注入2ML待测组织样液。

(2)向试管内注入双缩脲试剂A液1ml。摇匀。

(3)向试管内注入双缩脲试剂B液4滴。摇匀。

(4)待一段时间后观察其现象。

实验现象:

实验1.试管中溶液形成砖红色沉淀

实验2.试管中溶液被染成红色。

实验3.试管中荣产生紫色反应。

结论:

实验1 待测溶液中含有糖类。

实验2 待测溶液中含有脂肪。

实验3 待测溶液中含有蛋白质。

以上就是整个实验的报告,自己写的,希望给个辛苦分...。

五、检测生物组织中糖类脂肪蛋白质的实验原理

还原糖的鉴定原理:生物组织中普遍存在的可溶性糖的种类比较多,常见的有葡萄糖和果糖和麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的和具有还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基,因此叫作非还原糖,不具有还原性。斐林试剂只能鉴定还原糖,在加热的条件,能够与还原糖生成砖红色的沉淀(实际上是Cu2O)而葡萄糖则被氧化成葡萄糖酸。

蛋白质的鉴定与原理:鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲试剂。在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲能与铜离子作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应就叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此蛋白质都可以与双缩脲实试剂发生颜色反应,从而鉴定蛋白质的存在。

汇总:上文是一篇文章重复率有关的方法,可以做为检测相关的参考资料。